Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 2:54 min. • April 30th, 2023
Comience tomando una placa de pocillos múltiples que contenga células adherentes.
Trate estas células con un medio que contenga timidina tritiada, una versión radiactiva de la timidina, e incube.
Durante la incubación, las células que se replican activamente incorporan timidina radiactiva. Esta timidina se empareja con adenosina opuesta, generando ADN radiomarcado en células en proliferación.
Retire los medios gastados de los pocillos. Agregue un tampón de lisis para lisar las células y liberar ADN en la suspensión.
Prepare el conjunto del recolector de células colocando los tubos colectores del recolector sobre los pocillos de la microplaca.
Aplique presión de succión para permitir la aspiración de ADN suspendido de los pocillos. Este ADN se deposita en el papel de filtro, formando manchas específicas.
Recorta los trozos de papel de filtro con manchas de ADN. Transfiera estos chads individualmente a viales de centelleo.
Superponga el papel de filtro con un cóctel de centelleo. Coloque el vial en un contador de centelleo líquido.
Dentro del mostrador, el ADN marcado emite energía por desintegración radiactiva. Esta energía es absorbida por los componentes del cóctel de centelleo. E
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