Extracción de vesículas extracelulares: una técnica para aislar vesículas extracelulares de muestras de tejido completo mediante centrifugación diferencial

En tejidos completos, las células liberan vesículas extracelulares o VE en el líquido intersticial. Estos incluyen cuerpos apoptóticos, microvesículas y exosomas. Los EV juegan un papel importante en el mantenimiento de la comunicación de célula a célula.

Para extraer EV, comience tomando una muestra de tejido completo.

Tratar el tejido con un tampón de disociación adecuado. Los componentes del tampón de disociación desintegran la matriz extracelular presente en el tejido, lo que eventualmente afloja las células.

Transfiera la suspensión a un homogeneizador y altere mecánicamente el tejido aún más para disociarlo y liberar las células.

A continuación, centrifuga el homogeneizado a baja velocidad para peletizar las células y los fragmentos de tejido mientras los VE permanecen en el sobrenadante.

Tome el sobrenadante en un tubo nuevo. Centrifugar a alta velocidad para peletizar la mayoría de los cuerpos apoptóticos de mayor tamaño, dejando los VE de menor tamaño en el sobrenadante.

Recoja el sobrenadante que contiene EV en una jeringa. Filtre los componentes para eliminar los cuerpos apoptóticos restantes y recolectar la población de vehículos eléctricos de pequeño tamaño.

Centrifuga