Ensayo de permeabilidad de la barrera hematoencefálica: un ensayo in vitro para evaluar la permeabilidad del imitado de la barrera hematoencefálica a las moléculas trazadoras
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 2:53 min. • April 30th, 2023
La barrera hematoencefálica, o BBB, que consiste en células endoteliales, pericitos y astrocitos, regula la entrada y salida de moléculas biológicas y ayuda a mantener la homeostasis cerebral.
Para evaluar la permeabilidad del modelo de BHE in vitro, comience con un modelo de BHE in vitro que consiste en células endoteliales adheridas en el lado superior o sanguíneo del inserto de membrana porosa y astrocitos adheridos en el lado basal o cerebral de la membrana.
Las células endoteliales con su matriz extracelular entran en contacto con los astrocitos, formando el imitador de BBB.
Transfiera el volumen deseado de medios de la sangre y el lado del cerebro a una placa negra de múltiples pocillos para una medición óptima de la fluorescencia.
Reemplace el medio del lado sanguíneo del cultivo con medios que contengan moléculas trazadoras fluorescentes de peso molecular pequeño.
En cultivo, los contactos de células endoteliales y astrocitos mejoran la barrera celular y estabilizan la barrera hermética, limitando la difusión de moléculas trazadoras al lado cerebral del cultivo.
Además, recolecte volúmenes adecuados de medios de la sangre y el cerebro en los puntos de tiempo deseados. Reemp
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