Aislamiento de células cerebrales de larvas de pez cebra: una técnica para obtener neuronas, macrófagos y microglía intactos a partir de tejido cerebral de pez cebra

El cerebro del pez cebra consta de neuronas, células nerviosas que juegan un papel destacado en el procesamiento de la información. Además, comprende una población de células inmunitarias de apoyo, incluidos macrófagos y microglía, que habitan en el espacio interneuronal.

Para aislar todos estos tipos de células cerebrales de un pez cebra, primero, tome larvas de pez cebra anestesiadas en una placa de Petri que contenga los medios apropiados.

Visualice el pez cebra bajo un microscopio estereoscópico y corte las cabezas de las larvas por encima del saco vitelino para mantener el cerebro intacto.

Transfiera las cabezas extirpadas a un homogeneizador lleno de medios preenfriados, colocado sobre hielo. La baja temperatura ayuda a prevenir la degradación de las células cerebrales.

Con un mortero, homogeneizar el tejido cerebral del pez cebra. La homogeneización desintegra la matriz extracelular e inicia la disociación de neuronas, macrófagos y microglía del tejido cerebral.

Este paso también separa la mielina, una capa aislante rica en lípidos, de las neuronas.

Pase el homogeneizado a través de un colador para atrapar grupos de células grandes.

Centrifugar el filtrado para peletizar las