Generación de Células Madre Neurales Inducidas (iNSCs) a partir de Células Mononucleares de Sangre Periférica (PBMNCs): Un Procedimiento Basado en el Virus de Sendai para Reprogramar PBMNCs en iNSCs

Para reprogramar las células somáticas en células madre neurales inducidas o iNSC, células madre que poseen una alta capacidad de autorrenovación y diferenciación, comience cultivando células mononucleares de sangre periférica en un medio libre de suero para expandir los eritroblastos.

A continuación, pipetee la suspensión de eritroblastos en una placa de cultivo. Tratar las células con el virus Sendai recombinante o SeV. Estos virus codifican factores de transcripción de reprogramación. Centrifugar para sedimentar las células e incubar.

Después de la fusión de SeV a la membrana de la célula huésped, el genoma del virus se somete a una transcripción seguida de una traducción en el citoplasma. La expresión ectópica de los factores de transcripción desencadena el proceso de reprogramación celular sin integrar los genes en el genoma del huésped.

Ahora, centrifuga el cultivo para eliminar los virus. Vuelva a suspender las células transducidas en un medio adecuado, seguido de la siembra. Además, centrifugar para eliminar los desechos celulares. Vuelva a suspender las celdas en medios iNSC.

Posteriormente, siembre las células en una placa recubierta de proteínas. Las células se adhieren