Ensayo de migración de células madre de tumores cerebrales (BTSC) para estudios de tratamiento de fármacos: una técnica de imagen de células vivas in vitro para analizar el efecto del tratamiento con fármacos en la migración de BTSC

Las células madre tumorales cerebrales o BTSC, una subpoblación de células tumorales cerebrales, pueden iniciar el crecimiento tumoral y la metástasis, lo que las convierte en objetivos prometedores para la terapia del cáncer. Para estudiar el efecto de los fármacos sobre la migración de BTSC in vitro, primero, preparar suspensiones uniformes de BTSC en un medio adecuado. Trate una de las suspensiones con el medicamento de interés.

Mientras tanto, obtenga una placa de quimiotaxis de múltiples pocillos que consta de insertos membranosos que separan cada pocillo en cámaras superior e inferior. Pipetee la proteína de la matriz extracelular deseada en las cámaras inferiores y los insertos membranosos. Incubar para facilitar la polimerización de la proteína.

Agregue un medio basal adecuado que contenga el quimioatrayente deseado a las cámaras inferiores y colóquelo sobre los insertos membranosos. A continuación, siembre la suspensión de BTSC tratada con fármaco y no tratada en insertos membranosos. Obtener imágenes de la placa durante un período prolongado mediante microscopía de células vivas.

En cultivo, las BTSC se adhieren a la matriz proteica del inserto. En respuesta al gradiente