Ensayo de invasión de la neurosfera con células madre de tumores cerebrales (BTSC): un ensayo in vitro para analizar el efecto del tratamiento farmacológico en la invasión de BTSC desde la neurosfera

Las células madre de tumores cerebrales o BTSC, un subconjunto de células dentro de los tumores cerebrales, poseen capacidades de autorrenovación y contribuyen a la progresión tumoral y la resistencia a la terapia. Para determinar el efecto de los fármacos sobre la invasión de BTSC in vitro, comience con suspensiones de BTSC en un medio adecuado en matraces de cultivo. Trate una de las suspensiones con el medicamento de interés.

Incuba los frascos. Los componentes del medio promueven la proliferación celular. Las células permanecen en suspensión, formando así grupos esféricos llamados neuroesferas. Al alcanzar el tamaño deseado, recolecte las neuroesferas. Deje que sedimenten por gravedad y elimine los medios. Luego, vuelva a suspender las neuroesferas no tratadas y tratadas con medicamentos en medios refrigerados que contengan una proteína de matriz extracelular adecuada y el medicamento.

Coloque las suspensiones en una placa de pocillos múltiples refrigerada. Permita que las neuroesferas se sedimenten en el fondo del pozo para obtener mejores imágenes. A continuación, incube para la polimerización de proteínas de la matriz, incrustando las neuroesferas en su interior. Obtener imá