Aislamiento y cultivo de pericitos cerebrales primarios: un procedimiento para aislar y cultivar pericitos de capilares cerebrales bovinos sin contaminación de células endoteliales

En el sistema nervioso central, los pericitos son células multifuncionales que envuelven las células endoteliales, que forman el revestimiento celular interno de los capilares. Los pericitos ayudan a regular el flujo sanguíneo y mantienen la homeostasis cerebral.

Para aislar los pericitos, comience tomando capilares cerebrales bovinos congelados en un vial. Después de descongelar, transfiera el contenido a un tubo que contenga el medio deseado. Centrífuga para peletizar los capilares. Retire el sobrenadante que contiene el medio de congelación. Vuelva a suspender el sedimento capilar en un medio y siembre la suspensión en un matraz recubierto de proteína de matriz extracelular.

Incubar para permitir que los capilares se adhieran al recubrimiento del matraz. Reemplace el medio con medios que contengan heparina. En cultivo, el recubrimiento de proteína de la matriz extracelular promueve que los pericitos migren lejos de los fragmentos capilares y proliferen, mientras que la heparina estimula la migración de células endoteliales.

Reemplace los medios gastados con medios que contengan heparina. Con el tiempo, los pericitos proyectan procesos alargados que se adhieren fuertemente al mat