Aislamiento de capilares cerebrales del cerebro humano: un método optimizado para extraer capilares cerebrales del tejido cerebral humano

Los capilares cerebrales son un componente vital de la barrera hematoencefálica, una barrera semipermeable que permite el movimiento selectivo de solutos entre la sangre y el cerebro. Para aislar los capilares cerebrales, comience con tejido cerebral humano fresco. Retire las meninges y corte la materia blanca.

Pica el tejido cerebral en fragmentos más pequeños. Transfiera los fragmentos a un homogeneizador que contenga un tampón adecuado y homogeneice. La homogeneización desintegra los tejidos, liberando capilares y restos de tejido en la solución.

Transfiera el homogeneizado a un tubo nuevo y agregue un volumen óptimo de un medio de gradiente de densidad adecuado. Centrifugar la solución para peletizar los capilares. Demasiado o muy poco medio de gradiente de densidad da como resultado un bajo rendimiento capilar. Retire el sobrenadante.

Vuelva a suspender el gránulo en albúmina sérica bovina o tampón suplementado con BSA. BSA estabiliza las enzimas digestivas y mantiene la integridad estructural de los capilares. A continuación, filtre la solución con un filtro adecuado para eliminar los vasos grandes y los restos de tejido.

Luego, pase el filtrado a través de un filtro de malla