Entrega de genes basada en electroporación en el útero: una técnica para inyectar ADN plasmídico en células cerebelosas embrionarias de embriones murinos

0 visualizaciones • 5:19 min. • July 8th, 2025

Comience tomando una modelo de ratón hembra anestesiada embarazada colocada en posición supina. Prepara el ratón quitando el vello de la región abdominal. Hacer una incisión en la piel y las capas musculares subyacentes para exponer los cuernos uterinos, los sitios que albergan embriones viables.

Ahora, saque los cuernos uterinos de la cavidad abdominal. Tome un capilar de vidrio de punta afilada que contenga la solución de ADN plasmídico deseada. Localice el cerebro del embrión e inyecte la solución de ADN plasmídico a través de la pared del útero en el cuarto ventrículo. Esta posición es anterior al primordio cerebeloso, la ubicación deseada para la eventual entrega de ADN.

Después de la inyección, retraiga el capilar vacío. A continuación, para la electroporación del embrión inyectado de ADN, coloque los dos electrodos sobre la pared uterina de modo que el electrodo positivo cubra el primordio cerebeloso y el electrodo negativo cubra la región alrededor de las orejas.

Aplique pulsos eléctricos durante la duración deseada. Estos pulsos hacen que las células neuronales cerebelosas sean permeables, lo que permite que el ADN plasmídico ingrese a las células objetivo. Finalmente, vue

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Entrega de ADN plasmídico