Trasplante ortotópico a largo plazo de células tumorales en embriones de pez cebra: un método eficiente para administrar células tumorales en el cuarto ventrículo de embriones de pez cebra para el análisis a largo plazo del comportamiento de las células tumorales

Durante el trasplante ortotópico, las células tumorales o el tejido de un donante portador de tumores se trasplantan al tejido correspondiente de un receptor de la misma especie. Primero, prepare una suspensión uniforme, en un tampón adecuado, de células tumorales cerebrales marcadas con fluorescencia recolectadas de un pez cebra portador de tumores. Con una punta de carga de gel fino, cargue esta suspensión celular en una aguja de microinyección.

A continuación, asegure la aguja cargada en el soporte de un micromanipulador. Posteriormente, transfiera un embrión de pez cebra anestesiado a una placa de inyección prefabricada. Para facilitar el acceso durante la microinyección, coloque el embrión lateralmente para visualizar los ventrículos cerebrales, una red de cavidades llenas de líquido cefalorraquídeo dentro del cerebro.

Ajuste la punta de la aguja para inyectar la suspensión de células tumorales en el cuarto ventrículo, la cavidad en forma de diamante del rombencéfalo del embrión. Las células tumorales ocupan el espacio hueco dentro del ventrículo. Retraiga la aguja. Transfiera el embrión a una placa de cultivo que contenga solución salina. Observe el embrión bajo un microscopi