Inducción de glioblastoma mediante transposición mediada por SB: una técnica para generar un nuevo modelo de ratón mediante la integración mediada por transposones de plásmido SB en el cerebro de ratón neonatal

Comience tomando un tubo que contenga una mezcla de plásmidos. El plásmido transposón de la bella durmiente o SB está diseñado para transportar un elemento transponible que comprende un oncogén inductor de glioblastoma derivado de humanos intercalado entre dos secuencias repetidas invertidas. Además, esta mezcla contiene un plásmido de transposasa SB que tiene un elemento expresor de la enzima transposasa.

Ahora, agregue un reactivo de transfección adecuado al tubo. Aspire la mezcla inyectable en una jeringa equipada con una microaguja. A continuación, asegure un cachorro de ratón anestesiado en posición prona sobre un marco estereotáxico. Visualice la región de la cabeza del cachorro para ubicar las suturas craneales. Coloque la microaguja por encima de las suturas craneales.

Inyecte la mezcla en el ventrículo lateral, una cavidad dentro del parénquima cerebral. Posteriormente, la solución se dispersa en el parénquima cerebral, donde las moléculas reactivas de transfección facilitan la entrada de plásmidos dentro de las células. Una vez dentro de la célula, el plásmido de transposasa expresa las moléculas de la enzima transposasa, que reconocen las secuencias repetidas invertidas