Separación de variantes de ácido micólico basada en cromatografía de capa fina: un método para separar los lípidos de la pared celular micobacteriana en función de la polaridad

La pared celular de las micobacterias contiene diferentes variantes de ácidos micólicos: ácidos grasos de cadena larga con cadenas alfa conservadas. Existen diferencias estructurales en sus cadenas beta, lo que da lugar a variaciones en la polaridad de diferentes ácidos micólicos.

Para separar las variantes mediante cromatografía en capa fina, o TLC, una técnica de cromatografía líquida, tome los lípidos de la pared celular de las micobacterias en el disolvente orgánico deseado. Detecte los lípidos cerca de la base de una placa TLC prerecubierta con una capa delgada de material adsorbente, que funciona como fase estacionaria.

Coloque la placa dentro de un frasco que contenga un solvente orgánico, la fase móvil, asegurándose de que el nivel de líquido esté por debajo de los puntos de muestra para evitar la difusión prematura de los ácidos micólicos.

Durante la ejecución, la fase móvil se eleva a través de los pequeños poros de la capa adsorbente en la placa a través de la acción capilar. Finalmente, los ácidos micólicos se disuelven en el solvente y viajan hacia arriba.

La fase estacionaria polar adsorbe transitoriamente variantes más polares de ácido micólico a través de fuerzas in