Cromatografía líquida de interacción hidrofóbica dependiente de butilo: una técnica para caracterizar conjugados anticuerpo-fármaco basada en interacciones hidrofóbicas

Los conjugados anticuerpo-fármaco (ADC) se forman uniendo un anticuerpo monoclonal específico de la diana con fármacos citotóxicos a través de enlazadores adecuados. El proceso de conjugación estocástica crea ADC con diferentes números de restos de fármacos.

Las especies de ADC se caracterizan por su relación fármaco-anticuerpo o DAR, que determina su eficacia terapéutica. La hidrofobicidad de los ADC los convierte en candidatos adecuados para la cromatografía líquida de interacción hidrofóbica o la caracterización basada en HIC.

Para comenzar, ensamble una columna de cromatografía que contenga una fase estacionaria basada en matriz de agarosa. La matriz está reticulada a restos de butilo, los grupos funcionales de alquilo hidrofóbicos. Equilibre la columna con un tampón de alta unión a la sal. A continuación, cargue la solución ADC en la columna.

Los iones de sal en el tampón desplazan las moléculas de agua alrededor de los ADC, exponiendo sus regiones hidrofóbicas. Esto permite que los ADC se unan a los ligandos de butilo a través de interacciones hidrofóbicas. Los ADC con un mayor número de restos de fármacos unidos muestran una interacción más fuerte con la columna.

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