Ensayo de inmunoperlas multianalitos: una técnica de inmunoensayo basada en flujo para la detección simultánea de múltiples subtipos de anticuerpos en muestras de suero humano

El ensayo de inmunoperlas multianalitos utiliza múltiples microesferas recubiertas de antígeno para reconocer sus correspondientes anticuerpos diana simultáneamente.

Para comenzar este ensayo, tome una mezcla de microperlas en un tubo que contenga el tampón apropiado. Cada perla está recubierta con un antígeno específico en su superficie, lo que permite una fácil diferenciación de las perlas entre sí.

Pipetee la mezcla de inmunoperlas recubierta en los pocillos de una placa de ensayo de microtitulación. Complemente los pocillos con la muestra de suero que contiene diferentes isotipos de anticuerpos diana. Estas variantes tienen diferencias sutiles en sus estructuras, lo que permite que cada pocillo tenga múltiples anticuerpos primarios.

Incubar, para permitir que los isotipos de anticuerpos de la muestra se unan a antígenos específicos capturados en las respectivas inmunoperlas. Lavar con un tampón de ensayo para eliminar los anticuerpos primarios no unidos. Agregue anticuerpos secundarios marcados con colorante fluorescente, correspondientes a cada variante de anticuerpo primario, en el pocillo.

Cada anticuerpo secundario marcado se une al sitio Fc del anticuerpo primario respecti