Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 3:03 min. • July 8th, 2025
En los tejidos, el hierro, un mineral esencial crucial para diversos procesos metabólicos, normalmente existe secuestrado en hemoproteínas y proteínas de hierro no hemo. Las hemoproteínas incluyen hierro ferroso o hemo unido a anillos de porfirina, mientras que las proteínas de hierro no hemo carecen de la estructura del anillo de porfirina y comprenden principalmente hierro férrico o no hemo.
Para estimar el contenido de hierro no hemo en el tejido hepático de ratón, trate un fragmento de tejido hepático de ratón seco y recolectado con bajas concentraciones de ácido clorhídrico y ácido tricloroacético. Incubar a altas temperaturas para digerir el tejido y facilitar la precipitación de proteínas inducida por ácido.
Debido a las bajas concentraciones de ácido, el hierro no hemo se libera de las proteínas asociadas. El hierro hemo, al estar unido al anillo de porfirina, no se ve afectado.
Después de enfriar, transfiera el volumen deseado de sobrenadante que contenga hierro no hemo a una placa de pocillos múltiples. Añadir el quelante de hierro cromogénico, sulfonato de batofenantrolina, BPS, suplementado con ácido tioglicólico, un agente reductor, en tampón adecuado e incubar.
El áci
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