Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 4:25 min. • July 8th, 2025
En las células metabólicamente activas, los sustratos que contienen carbono se oxidan a través de una serie de reacciones bioquímicas para generar energía y liberar dióxido de carbono como subproducto.
Para determinar la tasa de oxidación del sustrato, comience con un cultivo adherente de las células indiferenciadas deseadas. Complemente las células en un medio con un sustrato adecuado que contenga carbono radiactivo catorce en su columna vertebral e incube.
Las células consumen el sustrato y lo oxidan para liberar dióxido de carbono radiomarcado, que se difunde fuera de las células hacia el medio circundante.
Transfiera este medio a un conjunto de captura de gas que contenga ácido perclórico para enfriar la reacción. Este tubo contiene un papel de filtro empapado en hidróxido de sodio colocado dentro de la tapa del tubo. Cierre la tapa e incube.
Durante la incubación, el dióxido de carbono, en su forma gaseosa, se libera dentro del tubo. El hidróxido de sodio absorbe el dióxido de carbono radiomarcado y lo atrapa en el papel de filtro. Transfiera este papel de filtro a un vial que contenga un cóctel de centelleo y colóquelo dentro del mostrador de centelleo líquido.
Dentro del mos
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