Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 4:10 min. • July 8th, 2025
Las septinas son proteínas citoesqueléticas que comprenden un dominio de unión a GTP flanqueado por dominios terminales amino y carboxilo, con una capacidad inherente para autoensamblarse en filamentos y estructuras de orden superior en la membrana plasmática interna para diversas funciones celulares.
Para estudiar las interacciones septina-membrana in vitro utilizando un imitador biológico de membrana, obtenga un tubo de microcentrífuga cortado. Aplique adhesivo ultravioleta sobre el borde plano sin cortar y colóquelo sobre un cubreobjetos de vidrio hidrofilizado tratado con plasma. Tras la exposición a la luz ultravioleta, el adhesivo se cura, creando una cámara de reacción abierta.
Transfiera vesículas lipídicas unilamelares zwitteriónicas monodispersas de la composición lipídica deseada, complementadas con tampón que contiene cationes mono y divalente, a la cámara. Los cationes facilitan que las vesículas lipídicas se adsorban y se acumulen en el cubreobjetos. Agite suavemente la cámara, iniciando la ruptura de la vesícula, e incube.
Las vesículas rotas se despliegan y se fusionan con el cubreobjetos a través de sus grupos de cabezas hidrofílicas, formando parches de bicapa lip
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos