Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 3:57 min. • July 8th, 2025
Durante la regeneración ósea, los osteoblastos, células formadoras de hueso, se reclutan en el sitio fracturado, donde proliferan y secretan osteoide, una matriz de colágeno. Después de un período de maduración, los osteoblastos mineralizan el osteoide mediante la deposición regulada de iones de calcio y fosfato, iniciando una nueva síntesis ósea.
Para cuantificar el grado de mineralización de osteoblastos in vitro, obtenga la suspensión primaria de osteoblastos en medios adecuados. Siembre la suspensión en una placa de pocillos múltiples que contenga discos porosos de sustituto de injerto óseo e incube.
Los discos sirven como andamio, lo que permite la adhesión y proliferación celular.
Reemplace los medios usados con medios nuevos que contengan suplementos osteogénicos. Incubar durante un período prolongado. Los suplementos osteogénicos estimulan a los osteoblastos para que produzcan y posteriormente mineralicen la matriz de colágeno.
Después de la fijación, tiña la matriz mineralizada con solución de rojo de alizarina S, ARS. ARS, un tinte cargado negativamente, se une a iones de calcio cargados positivamente en la matriz, formando un complejo de color rojo. Elimina el exceso de
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