Ensayo de alimentación de mosquitos: un método para evaluar los efectos de los compuestos de prueba sobre la mortalidad y la fecundidad de mosquitos hembra adultos

0 vistas3:56 min • July 8th, 2025

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Comience el ensayo de alimentación de mosquitos preparando una comida de sangre, agregando la concentración deseada de un compuesto de prueba activo en sangre de conejo desfibrinada. La harina de sangre carece de fibrina, lo que evita la coagulación de la sangre.

Cargue esta harina de sangre en el puerto de entrega de una unidad de alimentación por membrana. Conéctelo a una unidad de calentamiento, manteniendo la sangre a una temperatura óptima. Cubra la membrana con la solución de ácido láctico.

Coloque esta unidad en una jaula con mosquitos hembra adultos pre-hambrientos para aumentar las posibilidades de alimentación. Incubar en la oscuridad. El ácido láctico atrae a los mosquitos hacia la unidad de alimentación. Las condiciones oscuras los animan a alimentarse.

Transfiera los mosquitos alimentados con sangre a una cámara de crecimiento. Después de la digestión de la comida de sangre, el compuesto de prueba activo ingresa al cuerpo del mosquito, afectando varios órganos y causando la muerte de algunos.

Cuente el número de mosquitos muertos y calcule la tasa de mortalidad. Evaluar el efecto de la sustancia problema en el sistema reproductor de los mosquitos supervivientes introduciendo una huevera en la cámara.

Los mosquitos hembra utilizan proteínas de la harina de sangre y ponen huevos, que se acumulan dentro de la taza. Cuente el número de huevos, estimando la disminución de la fecundidad - capacidad de puesta de huevos.

La alta mortalidad y la baja fecundidad corresponden a la capacidad insecticida del compuesto.

Recoja aproximadamente 150 mosquitos hembra adultos de cuatro a cinco días de edad con un aspirador y transfiéralos a una jaula separada. Retire la fuente de azúcar de 1 a 24 horas antes del ensayo de alimentación.

Prepare una solución madre de 80 milimolares del compuesto de prueba en agua. Luego, dilúyalo en serie con agua para obtener soluciones madre de trabajo de las concentraciones deseadas.

Para obtener las concentraciones de prueba deseadas, agregue 40 microlitros de cada dilución a 960 microlitros de sangre de conejo desfibrinada en un tubo de 1,5 mililitros y mezcle mediante pipeteo. Coloque un filtro de membrana en una unidad de alimentación y séllelo con un anillo de goma.

A continuación, use una pipeta para transferir 1 mililitro de sangre con solución de prueba a través del puerto de administración ubicado en el reverso de la unidad de alimentación. Conecte la unidad de alimentación a una unidad de calefacción. Luego, frote suavemente la superficie de la membrana con una solución de ácido láctico al 10% recién preparada.

Coloque la unidad de alimentación en la jaula. Cubra la jaula con un paño oscuro y deje que los mosquitos se alimenten durante una hora. Después de que los mosquitos se alimenten, coloque la jaula en un refrigerador a 4 grados centígrados durante cinco minutos para anestesiar a los mosquitos. Luego, cuente y registre el número total de mosquitos en la jaula.

Al examinar el abdomen, cuente y registre el número total de mosquitos hembra alimentados total y parcialmente. Se debe obtener un mínimo de 50 mosquitos alimentados con sangre por dosis. Retire los mosquitos que no se hayan alimentado. Luego, transfiera la jaula a una cámara de crecimiento y use una hoja de puntuación para registrar la cantidad de mosquitos muertos en los momentos apropiados.

El día 3 después de la alimentación con sangre, coloque una huevera en la jaula durante 72 horas. Use un microscopio de disección para contar el número total de huevos producidos por tratamiento.

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Última actualización: 15 agosto 2026