Ensayo de tinción nuclear diferencial: un ensayo para determinar la citotoxicidad del mitocan mediante yoduro de propidio y doble tinción de Hoechst

Los mitocanos son una clase de medicamentos que afectan selectivamente el funcionamiento de las mitocondrias en las células cancerosas e inducen la apoptosis.

Para determinar la citotoxicidad de mitocan, siembre una suspensión celular que contenga células cancerosas semiadherentes en una placa de pocillos múltiples. Trate la placa con la solución mitocan deseada e incube.

Mitocan ingresa a la célula cancerosa para interrumpir su actividad mitocondrial, lo que eventualmente conduce a la muerte celular en las células cancerosas sensibles a mitocan. Trate las células con una solución de tinción que contenga una mezcla de colorante Hoechst y yoduro de propidio.

Hoechst, un tinte fluorescente permeable a la membrana, penetra en todas las células y se une a la región rica en AT de su ADN, impartiendo una fluorescencia azul a los núcleos de las células vivas y muertas.

Por el contrario, el yoduro de propidio, un tinte fluorescente impermeable a la membrana, ingresa exclusivamente a las células muertas a través de las partes dañadas de sus membranas. El tinte se intercala entre las bases de ADN, impartiendo una fluorescencia roja adicional a las células muertas. La presencia de ambos color