Ensayo de hemólisis: un método in vitro para medir la lisis inducida por ionóforos de calcio en eritrocitos humanos
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 4:12 min. • July 8th, 2025
La hemólisis es la ruptura de los eritrocitos para liberar su contenido celular en el espacio circundante.
Para analizar la hemólisis, comience con un tubo que contenga eritrocitos en una solución isotónica libre de glucosa y que contenga electrolitos en relación con los fluidos corporales. Esta solución mantiene intactos los eritrocitos y la ausencia de glucosa induce estrés celular. Esto activa los canales catiónicos permitiendo la entrada de iones de calcio en el espacio citosólico de la célula.
Añadir una solución que contenga una concentración óptima de ionóforos de calcio que se una a los iones de calcio y facilite su transporte al citosol, provocando una sobrecarga de iones de calcio en el interior de los eritrocitos.
Esta afluencia activa la escamblasa, una proteína que transloca los fosfolípidos entre las monocapas lipídicas de la membrana plasmática, interrumpiendo su asimetría. Este fenómeno también transloca la fosfatidilserina, un fosfolípido monocapa interno, a la monocapa externa, un indicador de eriptosis, muerte programada de eritrocitos.
Un aumento en los iones de calcio citosólicos activa los canales de potasio y expulsa los iones de potasio de la célula. Un dese
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