Bioensayo celular Caco-2: un método in vitro para medir la biodisponibilidad del hierro en fuentes alimentarias complejas
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 3:56 min. • July 8th, 2025
Los enterocitos son células especializadas del intestino delgado que desempeñan un papel crucial en la absorción de nutrientes, incluida la absorción de hierro.
Para evaluar la biodisponibilidad del hierro, la proporción de hierro ingerido accesible para funciones fisiológicas, tome una solución acidificada que contenga la muestra de alimento. Ahora, agregue pepsina, una enzima de digestión de proteínas, del estómago. A pH ácido, la pepsina inicia la digestión gástrica al descomponer proteínas dietéticas complejas en pequeños péptidos.
Agregue bicarbonato de sodio para aumentar el pH y detener la digestión gástrica. Agregue una solución que contenga enzimas pancreáticas y bilis para simular la digestión intestinal. Transfiera la mezcla a la parte superior de un sistema de cultivo celular de dos cámaras.
La cámara inferior contiene enterocitos diferenciados de Caco-2, una línea celular de adenocarcinoma de colon. Una membrana de diálisis separa la cámara superior de la inferior. La membrana permite la difusión de especies de bajo peso molecular.
La mezcla de enzimas pancreáticas y bilis en la cámara superior descompone los carbohidratos, las proteínas y los lípidos en subunidades má
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