Ensayo de liberación de enzimas mediadoras humanizadas: un método inmunoquímico para detectar el potencial alérgico del antígeno de prueba mediante el seguimiento de la respuesta de degranulación de basófilos in vitro

Cuando se exponen a un alérgeno (antígeno no patógeno), las células presentadoras de antígenos procesan y presentan el alérgeno a los linfocitos T auxiliares tipo 2. Estos linfocitos T hacen que los linfocitos B se diferencien en células plasmáticas y produzcan anticuerpos de inmunoglobulina E, IgE, que se unen a los receptores Fc específicos de IgE de alta afinidad en la superficie de los basófilos circulantes, células secretoras que contienen gránulos.

Tras la exposición posterior al alérgeno, los complejos IgE-Fc reconocen y se reticulan con el alérgeno, activando los basófilos para liberar gránulos que comprenden mediadores como citoquinas y enzimas lisosomales, incluida la β-hexosaminidasa, evocando una potente respuesta inflamatoria.

Para detectar el potencial alérgico de un antígeno de prueba in vitro, comience con una suspensión de basófilos cancerosos de rata transducidos que expresan receptores de Fc específicos de IgE humana. Tratar con suero humano que contenga IgE de un donante alérgico. Los anticuerpos IgE se unen y sensibilizan a los receptores Fc basófilos.

A continuación, agregue tampón y un volumen adecuado de antígeno de prueba a los basófilos sensibilizados. El