Ensayo de viabilidad de luciferasa basado en ATP: un método homogéneo para evaluar el potencial inhibidor del crecimiento de los agentes de prueba en organoides tumorales

El trifosfato de adenosina, ATP, la principal fuente de energía celular, es vital para diversas funciones celulares. Bajo estrés, los niveles intracelulares de ATP se ven afectados negativamente, lo que convierte al ATP en un buen marcador de células viables y metabólicamente activas.

Para comenzar, siembre la suspensión de células tumorales en una microplaca de fondo transparente con paredes negras para una dispersión mínima de la luz durante la medición de la intensidad de la luz. La microplaca consiste en un recubrimiento de hidrogel que evita que las células se adhieran a la placa, lo que permite la interacción de célula a célula y el autoensamblaje en organoides tumorales, cultivos de tejidos tridimensionales que imitan el microambiente tumoral.

A continuación, trátelo con un compuesto de prueba. El compuesto de prueba interactúa con las células organoides y, dependiendo de su potencial inhibidor del crecimiento, puede interrumpir los procesos metabólicos productores de energía, lo que resulta en el agotamiento intracelular de ATP.

Después del tratamiento, agregue un reactivo de un solo paso que comprenda detergentes, inhibidores de ATPasa, la enzima luciferasa, sustrato espec