Ensayo Bioreportero: Una técnica sensible que utiliza un sistema reportero bioluminiscente para detectar anticuerpos contra el SARS-CoV-2

Durante la infección por coronavirus 2 del síndrome respiratorio agudo severo, o SARS-CoV-2, el dominio de unión al receptor de la proteína de pico del virus, RBD, se une a la enzima convertidora de angiotensina 2 de la célula huésped, ACE2, lo que facilita la entrada de células virales. En respuesta, el sistema inmunológico produce anticuerpos que se unen al RBD viral y evitan la entrada celular, reduciendo la infectividad viral.

Para detectar anticuerpos contra el SARS-CoV-2 dirigidos a RBD, tome una suspensión de bioreportero recombinante que comprende fragmentos de proteínas de pequeño tamaño, fusionados con el RBD de pico del SARS-CoV-2. Agregue anticuerpos estándar contra el SARS-CoV-2 dirigidos a RBD y perlas magnéticas de unión a anticuerpos.

Durante la incubación, la región del anticuerpo Fc se une a los dominios de unión a Fc de las perlas. Además, el bioreportero recombinante se une a los anticuerpos contra el SARS-CoV-2 dirigidos a RBD unidos a perlas.

Después de la incubación, centrifugar la mezcla. Retire el sobrenadante que contiene bioreportero no unido. Vuelva a suspender las cuentas unidas en el tampón. Transfiera a una placa de varios pocillos.

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