Ensayo de parálisis fluorescente basado en reporteros: una técnica para evaluar la formación progresiva asociada a la edad de poliglutamina fluorescente reportera y la parálisis asociada en Caenorhabditis elegans

0 visualizaciones • 3:03 min. • July 8th, 2025

La homeostasis de las proteínas celulares, o proteostasis, implica la regulación del plegamiento y la función de las proteínas, junto con la degradación de las proteínas mal plegadas. Durante el envejecimiento, la maquinaria de proteostasis disminuye, lo que hace que las proteínas mal plegadas se acumulen y se agreguen aún más, lo que resulta en una disfunción celular.

Para determinar la disminución de la proteostasis asociada a la edad, comience con Caenorhabditis elegans transgénico adulto sincronizado con el desarrollo.

Las células musculares de estos gusanos expresan proteínas con repeticiones de poliglutamina expandida anormalmente, o polyQ, fusionadas con una etiqueta fluorescente. Las proteínas PolyQ son propensas a plegarse mal y, por lo tanto, al acumularse, pueden formar agregados.

Transfiera los gusanos a un portaobjetos de microscopio que comprende una almohadilla de agarosa e inmovilice con un producto químico adecuado para la obtención de imágenes de células vivas. Usando un microscopio de fluorescencia, visualice los músculos de la pared del cuerpo de los gusanos durante un período de tiempo para determinar las señales de focos fluorescentes brillantes, correspondien

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Agregación de poliglutamina