Ensayo de eferocitosis de células fijas: un método para estudiar la absorción eferocítica de células apoptóticas por macrófagos mediante microscopía de fluorescencia

Las células que experimentan apoptosis (muerte celular programada) muestran señales de "comerme" en su superficie celular, lo que facilita la degradación por parte de los fagocitos, células inmunes especializadas. Este proceso de eliminación de células apoptóticas se llama eferocitosis.

Para realizar el ensayo de eferocitosis, primero, tome una suspensión de células apoptóticas de doble tinción. Las superficies de estas células se marcan con biotina y el citoplasma se etiqueta con un tinte de seguimiento celular, marcando materiales derivados de células apoptóticas.

Agregue la suspensión celular en un cultivo de células de macrófagos adheridas, que funcionan como eferocitos. Centrifugar, forzando el contacto entre macrófagos y células apoptóticas, e incubar.

Los receptores eferocíticos de los macrófagos se unen a la fosfatidilserina, una señal de devome, en la membrana celular apoptótica, lo que facilita su engullimiento. Pequeños fragmentos de la célula apoptótica se recogen dentro de una vesícula unida a la membrana, llamada eferosoma.

Esto da como resultado una fracción eferocitosa, parte de la célula apoptótica dentro del macrófago, y una fracción no eferótica, la parte no inte