Ensayo de luciferasa para estudiar la eficacia de productos químicos antiparasitarios contra parásitos

Toxoplasma gondii, un parásito protozoario, se reproduce exclusivamente dentro de células huésped animales nucleadas. Invade las células huésped a través del proceso endocítico, formando una vacuola parasitófora. Dentro de la vacuola, el parásito ingiere proteínas citosólicas del huésped, adquiriendo nutrientes para el crecimiento.

Para evaluar la eficacia de los productos químicos antiparasitarios en los parásitos dentro de las células huésped, tome una placa de ensayo que contenga un cultivo adherente de fibroblastos del prepucio humano en múltiples pocillos.

Dispense cantidades iguales de parásitos Toxoplasma que expresan luciferasa, una enzima productora de luminiscencia, en cada pocillo. Incubar, permitiendo que los parásitos invadan las células huésped y crezcan dentro de la vacuola parasitófora.

Después de la incubación, aspirar el medio, eliminando los parásitos no ingeridos. Complemente los pocillos con diferentes concentraciones de compuesto antiparasitario dirigido a la cisteína proteasa e incube.

Las moléculas del fármaco ingresan a la célula huésped para llegar a los parásitos. Una vez dentro, el fármaco inhibe la enzima cisteína proteasa del parásito, interrumpiendo l