Ensayo de agregación PolyQ para identificar el efecto neuroprotector de un compuesto en gusanos

En algunos trastornos neurodegenerativos, la proteína asociada a la enfermedad comprende un tracto expandido de poliglutamina, polyQ, una cadena de residuos consecutivos de glutamina, y está conformada de manera aberrante. La conformación alterada desestabiliza la homeostasis de las proteínas, provocando la acumulación de proteínas y la formación de agregados tóxicos, lo que conduce a la disfunción neuronal y la muerte.

Para detectar la capacidad protectora de un compuesto de prueba para aliviar la proteotoxicidad asociada a la agregación de poliQ, obtenga una suspensión de larvas transgénicas de Caenorhabditis elegans que expresan proteínas poliQ marcadas con fluorescencia en células musculares de la pared corporal.

Tome una placa de pocillos múltiples que contenga medios complementados con alimentos bacterianos. Agregue el compuesto de prueba en un conjunto de pocillos. Transfiera las larvas a la placa de pocillos múltiples. Selle la placa para evitar la deshidratación del medio y la contaminación microbiana. Incubar, permitiendo que las larvas se conviertan en adultos.

Durante el desarrollo, a medida que el nematodo envejece, las proteínas polyQ se acumulan progresivamente dentr