Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 3:35 min. • July 8th, 2025
Las células generan bajos niveles de radicales libres durante los procesos metabólicos.
En condiciones patológicas, se produce una sobreproducción de radicales libres, lo que provoca estrés oxidativo. Estos radicales libres atacan los ácidos grasos poliinsaturados en los fosfolípidos de la membrana celular en un proceso llamado peroxidación lipídica. Esto forma productos de oxidación tóxicos, incluidos hidroperóxidos lipídicos y malondialdehído (MDA), que causan daño a la membrana y muerte celular.
Para detectar el estrés oxidativo en suero humano in vitro utilizando el ensayo de sustancia reactiva al ácido tiobarbitúrico (TBARS), comience con un tubo que contenga suero humano tratado con un compuesto inductor de oxidación. El suero tratado comprende principalmente productos de peroxidación lipídica (MDA e hidroperóxidos lipídicos) junto con fosfolípidos, lípidos y proteínas.
A continuación, agregue dodecil sulfato de sodio (SDS) y mezcle para solubilizar los lípidos y liberar el MDA. SDS desnaturaliza cualquier proteína contaminante. Añadir un tampón ácido adecuado, seguido de ácido tiobarbitúrico ácido (TBA). Incubar a alta temperatura.
En condiciones ácidas y altas temperaturas,
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