Ensayo de brotación de coroides para el estudio de la proliferación microvascular ocular ex vivo

En el ojo de los mamíferos, la coroides, ubicada entre la esclerótica y la retina, contiene macrófagos perivasculares y la coriocapilar, una capa de capilares sanguíneos revestidos por pericitos que suministra oxígeno y nutrientes a la retina. La aparición anormal de vasos sanguíneos en la coriocapilar se produce en varias enfermedades oculares vasculares.

Para estudiar la germinación coriocapilar desregulada ex vivo, tome explantes de ojo de ratón recolectados que contengan la coroides unida a la esclerótica y al epitelio pigmentario de la retina, o EPR.

Agregue gotas de extracto de membrana basal, o BME, un hidrogel enriquecido en proteínas de la matriz extracelular, a los pocillos de una placa de pocillos múltiples. Coloque los explantes en la gota, evitando el aplanamiento del tejido. Permita que el BME se solidifique.

Agregue medio suplementado con células endoteliales o factores de crecimiento específicos de EC. Incubar. El EPR secreta el factor de crecimiento endotelial vascular que, junto con los factores de crecimiento específicos de la CE, estimula la proliferación de la CE capilar.

El BME solidificado forma una matriz extracelular que promueve la proliferación de CE para