Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 3:52 min. • July 8th, 2025
Los estrógenos son hormonas esteroides que actúan como moléculas de señalización endocrina y se unen a los receptores nucleares: receptores de estrógeno beta, formando complejos de receptores de estrógeno-beta.
Estos complejos ligando-receptor se dimerizan y forman homodímeros en el citoplasma celular. El homodímero resultante ingresa al núcleo, se une al elemento de respuesta al estrógeno, ERE, una secuencia de ADN específica dentro del promotor del gen diana, e inicia la transcripción.
Para determinar la actividad estrogénica de los fitoestrógenos, metabolitos secundarios derivados de plantas que imitan la función del estrógeno, comience con una placa de múltiples pocillos que contenga células reporteras suspendidas en un medio apropiado.
Las células reporteras están diseñadas para sobreexpresar los receptores de estrógeno beta y transfectadas con un gen de luciferasa fusionado con el promotor ERE. Agregue la solución de muestra que contiene fitoestrógenos e incube.
Durante la incubación, el fitoestrógeno se une a los receptores de estrógeno, beta, expresados en las células reporteras. Una vez unidos, los complejos fitoestrógeno-receptor se dimerizan y se translocan al núcleo.
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