Ensayo basado en luminiscencia para evaluar la neurotoxicidad de los compuestos de ensayo en las neuronas

El crecimiento de neuritas, donde las neuronas desarrollan proyecciones, es crucial para la función y regeneración neuronal.

Para evaluar los efectos neurotóxicos de los compuestos de prueba promotores del crecimiento de neuritas in vitro, obtenga una suspensión de células progenitoras neurales humanas, hNPC, en medios de diferenciación.

Siembre las células en pocillos de placas de pocillos múltiples recubiertos con poli-L-lisina y laminina, lo que facilita la unión celular al fondo del pocillo y apoya el crecimiento celular. Los componentes del medio de diferenciación promueven la diferenciación de hNPC en neuronas.

Trate un conjunto de pocillos con un compuesto de prueba que promueve el crecimiento de neuritas. Esto interactúa con las neuronas derivadas de hNPC y puede inducir el crecimiento de neuritas, sin interrumpir los procesos metabólicos celulares y la concentración posterior de trifosfato de adenosina, ATP, la principal fuente de energía celular.

Agregue el reactivo de un solo paso que contiene detergentes, enzima luciferasa y sustrato de luciferasa, luciferina e inhibidores de ATPasa junto con iones de magnesio y mezcle.

Los detergentes alteran la membrana celular, lo qu