Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 3:52 min. • July 8th, 2025
Las neuronas en desarrollo extienden los procesos citoplasmáticos de sus cuerpos celulares mediante el crecimiento de neuritas para desarrollar dendritas y axones, que son esenciales para la comunicación de neurona a neurona.
Para estudiar el efecto de una proteína diana en el crecimiento de neuritas, tome una placa multipocillos con un cubreobjetos recubierto de poli-D-lisina en su base. La superficie del cubreobjetos tiene un cultivo adherente de neuronas corticales primarias derivadas del cerebro embrionario de rata.
Trate las neuronas con una mezcla que contenga dos tipos de plásmidos: un plásmido EGFP que codifica una proteína fluorescente verde mejorada y un segundo plásmido que codifica la proteína diana en un reactivo de transfección adecuado.
El reactivo de transfección facilita la entrada de los plásmidos en las células.
Después de la transfección, ambos plásmidos se expresan, produciendo proteínas fluorescentes verdes y proteínas diana. La expresión de EGFP imparte fluorescencia verde a las células cotransfectadas.
Las proteínas diana con potencial estimulante del crecimiento de neuritas inician la señalización celular, lo que promueve la reorganización del citoesqueleto
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