Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 6:43 min. • July 8th, 2025
Las interacciones proteína-proteína, IBP, son fundamentales para regular la mayoría de los procesos biológicos.
Para detectar IBP mediante biodetección de efecto de campo, comience con un chip de transistor de efecto de campo de grafeno. El chip comprende una superficie de grafeno funcionalizada con carboxilo como canal semiconductor entre la fuente y los electrodos de drenaje.
Incube el chip con una solución fresca de carbodiimida y N-hidroxisulfosuccinimida, sulfo-NHS, en un tampón zwitteriónico. Este tampón crea un pH adecuado, lo que permite que la carbodiimida y el sulfo-NHS activen los grupos carboxilo funcionalizados del chip, formando ésteres reactivos a las aminas.
Agregue la solución de proteína objetivo. Las aminas primarias reaccionan con los ésteres reactivos a las aminas, inmovilizando las proteínas del chip a través de la formación de enlaces amida. Agregue una solución de enfriamiento que contenga aminas para bloquear los ésteres reactivos a las aminas no unidos, evitando la unión no específica.
Inserte el chip en el lector electrónico y calibrícelo con un tampón. El lector aplica un voltaje constante entre los electrodos. Se mide el flujo de corriente eléctrica res
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