Técnica de microgravimetría disipativa para estudiar la interacción proteína-bicapa lipídica

Para estudiar la interacción entre una proteína de unión a fosfolípidos y una bicapa lipídica a través de microgravimetría disipativa, tome una microbalanza con un sensor de cuarzo. Al aplicar un voltaje adecuado, la capa de cuarzo, intercalada entre dos electrodos metálicos, oscila a una frecuencia específica.

Agregue una suspensión de pequeñas vesículas unilamelares, que consisten en una sola bicapa lipídica, en el sensor. Las vesículas se adsorben en la superficie hidrófila recubierta de sílice, aumentando la masa del sensor y disminuyendo proporcionalmente su frecuencia de oscilación.

Las vesículas llenas de tampón actúan como una capa viscoelástica, lo que conduce a la disipación, la amortiguación de la oscilación. Las vesículas adsorbidas se rompen, liberando el tampón cerrado. La disminución resultante de la masa aumenta la frecuencia de oscilación.

Las vesículas rotas forman una bicapa continua, imitando una membrana biológica. La rigidez de la bicapa disminuye la disipación.

Agregue un tampón que contenga iones de calcio, junto con la proteína objetivo. Los iones de calcio se unen a la proteína y cambian su conformación, lo que permite la unión a las moléculas lipídicas en