Sonda de fuerza de biomembrana para cuantificar las interacciones receptor-ligando

La interacción entre un receptor de células T, TCR, y un péptido antigénico presentado por el MHC, o complejo principal de histocompatibilidad, en una célula presentadora de antígeno, APC, hace que la célula T ejerza una fuerza mecánica sobre la APC. Este fenómeno es necesario para la activación de las células T.

Para cuantificar las interacciones receptor-ligando utilizando una sonda de fuerza de biomembrana, BFP, comience con una cámara celular personalizada basada en portaobjetos. Coloque la cámara celular bajo un microscopio.

Inyecte suspensiones de glóbulos rojos hinchados biotinilados, sonda de vidrio recubiertas con complejos MHC-estreptavidina-biotina unidos a péptidos y células T en la cámara. Coloque las micropipetas llenas de tampón de sonda, objetivo y ayudante alrededor de la cámara.

Aspire un eritrocitos biotinilados con la pipeta de la sonda, colocándolo en un área en blanco. Aspire una célula T con la micropipeta objetivo, colocándola a la derecha de los glóbulos rojos. Aspire una perla de sonda con la micropipeta auxiliar y conéctela al ápice de los glóbulos rojos. La estreptavidina de la perla se une a la biotina de los glóbulos rojos y forma una sonda de fuerza.