Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 4:56 min. • July 8th, 2025
Los nucleosomas, unidades repetidas de ADN eucariotas, consisten en segmentos de ADN envueltos alrededor de núcleos de proteínas histonas. El ADN que se desenvuelve alrededor del núcleo de histonas es crucial para la dinámica de los nucleosomas.
Para capturar la dinámica de los nucleosomas, comience con un sustrato de mica liso y funcionalizado montado en una etapa de escáner de microscopio de fuerza atómica, AFM. Cubra el sustrato con un tampón que contenga nucleosomas.
El ADN del nucleosoma cargado negativamente interactúa con las cargas positivas en la mica funcionalizada, inmovilizándola en la superficie. Lave el sustrato de mica inmovilizado con un tampón para evitar el hacinamiento de los nucleosomas.
Transfiera la etapa del escáner que contiene nucleosomas a una cámara de imágenes que contenga un voladizo premontado, con una punta en el borde y mirando hacia arriba hacia los nucleosomas.
Llene la cámara con un tampón de imágenes. Alinee el rayo láser en la parte posterior del voladizo para garantizar mediciones precisas de deflexión.
La punta de AFM oscila cerca de los nucleosomas completamente envueltos y escanea la superficie para medir la altura de los nucleosomas a inter
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