Una técnica para aislar mastocitos primarios de una cavidad peritoneal murina
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 4:17 min. • July 8th, 2025
Los mastocitos, glóbulos blancos que contienen gránulos citoplasmáticos llenos de mediadores inflamatorios, juegan un papel importante en las respuestas inmunitarias innatas y adaptativas.
Para aislar los mastocitos de tipo tejido conectivo de la cavidad peritoneal, un espacio lleno de líquido que alberga órganos abdominales, tome un ratón sacrificado fijado en posición supina. Hacer una incisión longitudinal hasta el esternón, exponiendo la pared abdominal.
La cavidad peritoneal se encuentra debajo de la pared abdominal y contiene líquido que alberga varias células inmunitarias, incluidos macrófagos, linfocitos, leucocitos polimorfonucleares y mastocitos.
Para aislar las células mediante lavado peritoneal, aspirando el contenido intraperitoneal, inyecte un medio de crecimiento helado en la cavidad peritoneal sin perforar los órganos, evitando fugas de sangre. El medio frío ayuda a mantener la viabilidad celular.
Agite con cuidado el ratón durante un tiempo adecuado, mezclando las células inmunitarias con el medio. Inserte una jeringa vacía en la cavidad. Aspire lentamente el medio, recuperando la mayor parte del líquido inyectado para un mejor rendimiento celular.
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