Evaluación de la colitis inducida por químicos mediante análisis inmunohistoquímico de secciones de tejido del colon
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:23 min. • July 8th, 2025
En ratones, la capa mucosa del colon consiste en células inmunes que contienen lámina propia, rodeadas por un epitelio apretado que protege la mucosa. El tratamiento químico con sulfato de sodio dextrano interrumpe las uniones estrechas, causando daño a las células epiteliales y permitiendo que los microbios luminales penetren en la lámina propia.
El reconocimiento microbiano en el colon desencadena la secreción de quimiocinas, lo que conduce a la infiltración de células inmunes y la liberación de citoquinas proinflamatorias. Esta respuesta inmune exagerada da como resultado inflamación del colon o colitis.
Para evaluar la colitis inducida por productos químicos, comience con un portaobjetos de vidrio que lleve una sección fija de tejido de colon de ratón pretratada que exhiba colitis inducida por productos químicos. Trate la sección con un cóctel de anticuerpos primarios específicos para los receptores de las células inmunitarias que se unen a sus respectivas células inmunitarias.
Lavar para eliminar los anticuerpos no unidos. Incube la sección de tejido con anticuerpos secundarios biotinilados, que se unen específicamente a los anticuerpos primarios. Incubar con los conjugados es
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