Respuesta inmunitaria

Este video muestra imágenes in vivo para estudiar la dinámica de reclutamiento de neutrófilos en un sitio de infección en un ratón transgénico inmunocomprometido con neutrófilos que expresan GFP. Consiste en inyectar bacterias luminiscentes para causar una infección. Esto conduce al reclutamiento de neutrófilos al sitio de la infección, cuyo seguimiento se realiza mediante imágenes.

En este video, demostramos la activación de macrófagos derivados de la médula ósea en respuesta al lipopolisacárido bacteriano y la inmunoglobulina intravenosa.

Este video muestra la activación de los macrófagos peritoneales de un ratón utilizando inmunoglobulina intravenosa y lipopolisacárido bacteriano. La coestimulación activa los macrófagos peritoneales en macrófagos antiinflamatorios que poseen actividad inmunorreguladora.

Este video muestra una técnica ex vivo para inducir la muerte de células cerebrales mediada por células T CD8+ citotóxicas. Al obtener cortes de cerebro, las células T CD8+ dirigidas a oligodendrocitos activados se transfieren a los cortes para dirigirse a la vaina de mielina y a los oligodendrocitos. Después de la incubación, el daño a la mielina y la muerte neuronal se pueden evaluar histológicamente en las regiones de interés.

En este video, describimos un protocolo para probar la eficacia de una vacuna acelular contra la tos ferina contra la infección por Bordetella pertussis en ratones. Después de la vacunación, los ratones se sometieron a la infección y su homogeneizado de tejido se cultivó para analizar las colonias bacterianas como una lectura de la inmunidad protectora inducida por la vacuna.

En este video, describimos un método para estudiar la dinámica de los orgánulos en los linfocitos B después de su activación con microperlas recubiertas de antígenos.

Este vídeo muestra la activación de los linfocitos B in vitro. El proceso implica la interacción del antígeno con los receptores de las células B, lo que conduce a la remodelación del citoesqueleto, la formación de sinapsis inmunitaria, el movimiento de los lisosomas, la internalización del antígeno, el procesamiento y la posterior presentación en las moléculas MHC para la activación de las células B.

Este video muestra una técnica para generar un modelo murino de colitis inducido químicamente, una enfermedad inflamatoria intestinal. Se permite que el ratón consuma una solución de sulfato de sodio de dextrano (DSS) durante un tiempo adecuado. Al consumirlo, el DSS daña la mucosa y la barrera de la capa epitelial en el colon, lo que permite que los microbios intestinales ingresen al tejido subyacente, donde son detectados por las células inmunitarias residentes para mediar una respuesta...

En este video, demostramos el efecto de diferentes concentraciones de anticuerpos anti-c-fms en la osteoclastogénesis, que es el proceso de formación de osteoclastos a partir de progenitores de osteoclastos.

Este vídeo demuestra la cuantificación de mediadores inflamatorios durante la infección mediante la incubación de células inmunitarias derivadas de tejido pulmonar humano con Haemophilus influenzae. La citometría de flujo se utiliza para medir la fluorescencia de las citocinas en los linfocitos marcados, lo que se correlaciona con la producción de citocinas proinflamatorias en respuesta a la infección bacteriana.

En este video, demostramos un ensayo de quimioluminiscencia in vitro para detectar la generación de especies reactivas de oxígeno por parte de los neutrófilos al exponerse a una biopelícula bacteriana opsonizada.

Este video muestra un ensayo in vitro para estudiar la interacción entre neutrófilos y biopelícula. Las bacterias patógenas incrustadas en la biopelícula y los neutrófilos aislados se marcaron mediante marcadores fluorescentes, y la respuesta inmunitaria de los neutrófilos y la evasión de la respuesta inmunitaria de las bacterias se evaluaron mediante un microscopio de fluorescencia.

Este video muestra un método para detectar la activación del inflamasoma NLRP3 en macrófagos utilizando sondas reporteras fluorescentes. Las células se tratan con ionóforos de potasio y glicina para inducir el ensamblaje del inflamasoma y la activación de la caspasa-1. Las sondas reporteras fluorescentes visualizan la caspasa-1 activada y las células se tiñen con un tinte fluorescente para la visualización de los núcleos.

Este video muestra una técnica para estudiar la formación de inflamasomas que contienen el dominio de pirina 3 (NLRP3) de la familia de receptores similares a NOD en macrófagos primarios mediante inmunofluorescencia. Los macrófagos se preparan primero con lipopolisacárido bacteriano (LPS) para regular al alza la expresión de la proteína NLRP3. La exposición de los macrófagos a la nigericina, un ionóforo de potasio, conduce a la activación de NLRP3 y a la formación de inflamasomas, que se...

Este video muestra el ensayo de lactato deshidrogenasa para detectar la muerte de macrófagos mediada por inflamasoma. Los macrófagos se exponen al lipopolisacárido para el cebado, seguido de la exposición a la nigericina para causar la muerte celular inducida por el inflamasoma, que se determina mediante el ensayo de lactato deshidrogenasa.

Este video demuestra la inducción y visualización de trampas extracelulares de neutrófilos o NETs en neutrófilos premarcados utilizando suero del paciente que contiene anticuerpos anti-citoplasma de neutrófilos. Además, el uso de un tinte de ADN impermeable y la microscopía de fluorescencia permite la visualización de los NET.

Este video muestra el aislamiento de lípidos de neutrófilos humanos mediante un sistema de solvente bifásico que utiliza metanol y cloroformo.

En este video, demostramos un ensayo de citotoxicidad para evaluar la infección por Cryptococcus neoformans, un hongo patógeno, en macrófagos. La citotoxicidad está determinada por la liberación de la enzima lactato deshidrogenasa citoplasmática debido a la lisis de macrófagos causada por la infección por Cryptococcus neoformans.

Este video muestra un sistema de infección basado en insertos de membrana permeable para evaluar el impacto de las toxinas bacterianas secretadas. Al eliminar el contacto directo entre el patógeno bacteriano y las células huésped mediante una membrana permeable, esta técnica permite estudiar el efecto de las toxinas secretadas por las bacterias patógenas en las células huésped de mamíferos.

Este video muestra un sistema de inserción de membrana permeable para investigar el impacto de las toxinas bacterianas en las células huésped de manera controlada y aislada. Este enfoque permite la exposición selectiva de las células a las toxinas mientras se mantiene una separación física que imita la interacción natural huésped-patógeno.

Este video muestra el ensayo de adherencia bacteriana para evaluar la adherencia bacteriana marcada con GFP al cultivo de células epiteliales para estudiar la dinámica de las interacciones huésped-patógeno utilizando imágenes basadas en microscopía de fluorescencia.

Este video muestra una técnica para detectar la respuesta local y global de iones de calcio tras la infección por Shigella de células epiteliales humanas. La Shigella invade las células huésped y libera efectores de invasión, lo que afecta los niveles de calcio intracelular. La amplitud y frecuencia del calcio citosólico local y global se estudian utilizando un indicador fluorescente.

Este video analiza la formación de sinapsis inmune entre las células T en preparaciones panleucocitarias no purificadas y la enterotoxina B de Staphylococcus aureus, células Raji cargadas de SEB. El enriquecimiento de CD3 y F-actina se observa en la sinapsis inmunitaria mediante citometría de flujo por imágenes.

Este video muestra un ensayo para estudiar la regulación de la fagocitosis de macrófagos con células madre mesenquimales (MSC) en un co-cultivo. Al co-cultivar MSC con macrófagos, se añaden partículas de zymosan no opsonizadas conjugadas a un fluoróforo sensible al pH para ser fagocitadas por los macrófagos. Con el aumento de la fagocitosis, la intensidad de la fluorescencia aumenta, lo que permite determinar la regulación de la actividad fagocítica mediada por MSC.

En este video, demostramos la administración intracisternal de Neisseria meningitidis en un modelo de ratón para generar infección por meningitis.

En este video, describimos un método para identificar los inhibidores de quinasas de moléculas pequeñas que modulan la apoptosis de timocitos inmaduros CD4+CD8+ doblemente positivos autorreactivos. La apoptosis se induce en los timocitos dobles positivos activándolos con perlas magnéticas recubiertas de anti-CD3 y anti-CD28; A continuación, se realiza un tratamiento con inhibidores de moléculas pequeñas y un análisis de citometría de flujo para detectar si los inhibidores modulan la expresión...

En este video, describimos un procedimiento para realizar una nanoinyección de un virus de ARN monocatenario de sentido positivo en moscas Drosophila macho adultas y posteriormente estudiar las respuestas antivirales iniciadas debido a la infección. El análisis de la reacción en cadena de la polimerasa identifica la regulación positiva de genes específicos en las moscas infectadas que indican la activación de vías de respuesta inmunitaria, incluida la interferencia de ARN y la señalización...

Este video muestra el método de tinción de hematoxilina y eosina (H&E) para evaluar el daño en el colon en un modelo murino de colitis inducida por DSS, una enfermedad inflamatoria intestinal. Al aislar el colon de un ratón tratado con DSS y obtener secciones del tejido, la tinción con H&E de las secciones ayuda a identificar el daño tisular mediado por la inflamación.

En este video, describimos la metodología para establecer un sistema de cultivo de órganos intestinales ex vivo para estudiar las interacciones entre fragmentos de tejido intestinal de ratón y bacterias intestinales específicas. El dispositivo consta de dos pares de puertos de entrada-salida, el primero que conecta la luz del tejido intestinal y suministra la suspensión bacteriana específica en él, y el segundo que suministra continuamente medios a los pocillos del dispositivo para mantener la...

Este vídeo muestra una técnica in vitro para estudiar el impacto del tratamiento antimicrobiano en los agregados de Pseudomonas aeruginosa (Pa). Las células Pa marcadas con fluorescencia se cultivan como agregados, imitando el patrón de crecimiento durante la infección. Al desafiar los agregados con una concentración subletal del antibiótico colistina, la evaluación en tiempo real de la interacción bacteria-antibiótico se realiza mediante microscopía de fluorescencia.

Este video muestra una técnica de cuantificación in vitro para determinar la infección de macrófagos por Listeria monocytogenes mediante el ensayo de la unidad formadora de colonias. Las colonias bacterianas en la placa de agar representan la población bacteriana intracelular que escapa al mecanismo de defensa del huésped y sobrevive dentro de los macrófagos.

En este video, cuantificamos Listeria monocytogenes intracelular y extracelular, una bacteria patógena intracelular, después de su infección de macrófagos cultivados in vitro mediante citometría de flujo.

Este video muestra la nanoinyección de suspensión bacteriana en la cavidad del cuerpo de la mosca, lo que resulta en la multiplicación e infección bacteriana. La respuesta inmunitaria de la mosca elimina algunas bacterias, mientras que otras escapan a la eliminación inmunitaria y sobreviven dentro del huésped causando una infección.

Este video muestra una técnica para infectar Drosophila mediante la introducción de una bacteria patógena directamente en su cavidad corporal. Este método evita las barreras epiteliales y otros mecanismos de defensa pasiva, lo que permite la inducción de una infección sistémica. Tras la infección, la respuesta inmunitaria resultante se evalúa mediante el seguimiento de la mortalidad de la mosca y la realización de ensayos posteriores.

En este video, demostramos una técnica para medir la carga bacteriana de E. coli después de inyectar E. coli en el tórax de Drosophila melanogaster.

En este video, demostramos el ensayo de efecto citopático para determinar la dosis viral infecciosa de cultivo de tejidos del virus Drosophila C en células Drosophila S2*. Se utiliza una variedad de concentraciones virales para infectar las células cultivadas. Se determina la proporción de células que presentan cambios estructurales y estos datos se utilizan para calcular la dosis infectiva del cultivo de tejidos.

Este video muestra un método para inducir la inflamación de la superficie ocular y la disfunción de la glándula de Meibomio en un modelo murino. La estimulación del sistema inmunitario del ratón mediante un inmunógeno y la posterior reestimulación con el mismo inmunógeno promueve la inflamación de la superficie ocular, lo que provoca el taponamiento de la secreción de la glándula de Meibomio a través de los aggNET producidos por neutrófilos y conduce a la enfermedad del ojo seco.

Este video demuestra la activación de proteínas caspasas en macrófagos humanos utilizando proteínas reporteras de complementación de fluorescencia bimolecular. Los prodominios de la caspasa-1 se fusionan con fragmentos no fluorescentes de las proteínas de Venus, que se reclutan para los complejos de inflamasoma. La proximidad de los inflamasomas induce el repliegue y la fluorescencia de los fragmentos de Venus, lo que confirma la activación de las caspasas en los macrófagos.

Este video demuestra el efecto de las preparaciones de productos de tabaco, TPP, en la producción de citocinas a partir de células mononucleares de sangre periférica humana utilizando citometría de flujo. El tratamiento de las células con TPP regula a la baja la producción de citocinas proinflamatorias, que se estima después de la estimulación con lipopolisacáridos, seguida de inmunotinción y análisis de citometría de flujo.

En este video, demostramos la preparación de biofilm in vitro por S. aureus en una placa multipocillos recubierta de poli-L-Lisina. La placa formada por biopelícula se puede utilizar para experimentos posteriores.

Este video muestra una técnica in vitro para estimular linfocitos a través de Haemophilus influenzae (NTHi) no tipificable y para evaluar la respuesta inmune. La incubación de células mononucleares aisladas de sangre periférica (PBMC) con NTHi hace que las células bacterianas estimulen los linfocitos T, lo que conduce a la producción de citocinas. Al inhibir la secreción de citocinas, se realiza una tinción de inmunofluorescencia para detectar las citocinas intracelulares acumuladas en los...

Este video muestra la evaluación de la colitis inducida por químicos a través de la tinción inmunohistoquímica del tejido del colon de ratón. En una sección de tejido teñido, la presencia de un gran número de células que responden al sistema inmunitario en el tejido dañado representa la infiltración de células inmunitarias durante la colitis.

En este video, estudiamos el efecto de un medio completamente acondicionado por humo, una preparación de producto de tabaco combustible, sobre la destrucción de células K562 por células mononucleares efectoras de sangre periférica.

Este vídeo muestra una técnica in vivo para evaluar un antígeno de prueba mediante la inducción de inflamación de la piel en un modelo murino. El antígeno de prueba, un hapteno en una solución de aceite y acetona, se aplica tópicamente en la piel de la oreja del ratón y se evalúa la inflamación de la piel después de un período adecuado.

Este video muestra un procedimiento de biopsia con sacabocados para crear una herida precisa en un modelo de ratón. La escisión expone la capa subcutánea de la piel, proporcionando un sitio adecuado para estudiar las respuestas inmunitarias a la infección por patógenos localizados.