Un ensayo para evaluar el efecto de los compuestos de prueba en la entrada y fusión viral en las células huésped
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 2:38 min. • July 8th, 2025
Tome células de cáncer de hígado e incube a baja temperatura para afectar la endocitosis.
Introducir un virus de la hepatitis C o VHC recombinante, que comprende un genoma de ARN diseñado que codifica un indicador de luciferasa secretado.
Las lipoproteínas virales interactúan con los proteoglicanos en las células huésped, mientras que las glicoproteínas de la envoltura viral se unen a receptores específicos del huésped.
En pocillos seleccionados, agregue el compuesto de prueba que se une a las glicoproteínas virales.
Tras la incubación a temperatura fisiológica, los virus unidos son endocitados.
Deseche los virus no internalizados, agregue un medio de crecimiento e incube.
En los pocillos no tratados, las glicoproteínas ayudan a la fusión de la envoltura viral-endosoma, liberando la nucleocápside, mientras que el enmascaramiento compuesto perjudica la fusión en los pocillos tratados.
Tras la liberación, el ARN expresa proteínas virales, incluida la luciferasa, que se secreta extracelularmente.
Coseche el sobrenadante que contiene luciferasa y agregue un sustrato bioluminiscente, que es oxidado por la luciferasa para emitir luz.
Una disminución de la luminiscencia en los pocillos tr
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