Generación de variantes de escape del virus de la influenza contra anticuerpos neutralizantes

Tome una suspensión del virus de la influenza, que contenga cepas de tipo salvaje y mutantes.

Una glicoproteína de la envoltura viral denominada hemaglutinina, o HA, se une al ácido siálico en la superficie de la célula huésped, mediando la entrada viral.

Agregue un anticuerpo neutralizante en concentraciones decrecientes que se une al HA, bloqueando el sitio de unión del ácido siálico.

Las cepas mutantes, portadoras de mutaciones en el HA que ayudan a evitar la neutralización de anticuerpos, se denominan variantes de escape.

Inyecte la mezcla en huevos de gallina embrionados libres de patógenos, administrando los virus en el líquido alantoideo e incube.

Los virus neutralizados por anticuerpos no pueden ingresar a las células de la membrana corioalantoidea. Los virus mutantes no neutralizados ingresan a las células, se replican y se liberan en el líquido alantoideo.

Recolecte el líquido alantoideo que contiene la población del virus.

Introducir un anticuerpo específico de HA en concentraciones decrecientes, que neutraliza las otras cepas excepto las variantes de escape.

Introducir glóbulos rojos de pollo o glóbulos rojos. Las variantes de escape no neutralizadas se unen a las célul