Fotoinmunoterapia de infrarrojo cercano para la eliminación de células dirigidas en cultivos 3D mixtos

Tome un cultivo de esferoides mixtos de gotas colgantes, que son agregados celulares heterogéneos que consisten en células diana que expresan receptores de factores de crecimiento y una proteína fluorescente, mientras que las células no diana expresan una proteína fluorescente de diferente color.

Reemplace el medio con un conjugado anticuerpo-fotoabsorbente que comprenda un anticuerpo monoclonal específico de la célula diana y un colorante fotoabsorbente.

Incubar para facilitar la unión de anticuerpos a los receptores celulares diana.

Lave los esferoides con medios para eliminar los conjugados no unidos, luego transfiéralos a un plato con fondo de vidrio con medios para la irradiación de luz.

Exponer los esferoides a la luz infrarroja cercana para la fotoinmunoterapia, desencadenando una reacción fotoquímica del colorante fotoabsorbente en las células diana, causando un rápido daño a la membrana celular y la muerte celular.

Este proceso elimina las células diana sin dañar las células no diana.

Transfiera los esferoides a un plato colgante fresco. Agregue medios e incube para el crecimiento de esferoides.

Bajo un microscopio de fluorescencia, la ausencia de fluorescencia de células