Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 5:23 min. • July 8th, 2025
Comience con células de sangre del cordón umbilical humano, incluidas las células madre hematopoyéticas CD34+ o HSC.
Agregue anticuerpos para bloquear los receptores celulares Fc, evitando la unión no específica de las perlas magnéticas específicas de HSC.
Introduzca las perlas magnéticas recubiertas de anticuerpos dirigidas a las HSC CD34+. Centrifugar y desechar el sobrenadante.
Vuelva a suspender las celdas en un búfer. Páselos a través de un separador magnético para retener las HSC unidas a las perlas; las células no unidas fluyen a través.
Retire el campo magnético para recoger las HSC.
Centrifugar y resuspender las células en un medio de cultivo. Coloque las células en placas e incube.
El medio contiene factores de crecimiento y citocinas que promueven la supervivencia y expansión del HSC.
Cosecha las células. Agregue un medio de congelación, transfiéralo a un criovial y congele.
Para generar un modelo de ratón del sistema inmunológico humano, o HIS, descongele las HSC. Agréguelos a un medio precalentado.
Centrifugar y volver a suspender las células en un tampón.
Las células están listas para inyectarse en un cachorro de ratón inmunodeficiente para la generación de modelos HI
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