Evaluación de la eficacia antitumoral de una proteína inmunomoduladora bacteriana en un modelo murino

Comience con un ratón hembra anestesiado en posición supina, con tumores uroteliales en el epitelio de la vejiga.

Asegure las patas traseras, ubique la abertura uretral e inserte un catéter en la vejiga del ratón. Lave la vejiga para eliminar la orina.

Inyecte la proteína activadora de neutrófilos Helicobacter pylori, o HP-NAP, una proteína bacteriana inmunomoduladora.

En el microambiente tumoral, HP-NAP interactúa con los receptores tipo Toll en los neutrófilos e inicia una cascada de señalización, aumentando la expresión de citocinas proinflamatorias.

Las citocinas desencadenan la diferenciación de los linfocitos T vírgenes en linfocitos T auxiliares tipo 1, o Th1, y linfocitos citotóxicos tipo 1, o Tc1, que producen interferón-gamma.

El interferón gamma inhibe la formación de nuevos vasos sanguíneos, lo que limita la disponibilidad de nutrientes y oxígeno para el tumor.

Además, regula al alza las moléculas MHC presentadoras de antígenos tumorales en las células tumorales, lo que facilita la interacción con las células Tc1.

Esta interacción da como resultado la liberación de moléculas citotóxicas que inducen la muerte de las células tumorales, lo que demuestra la eficacia antitumoral de HP-NAP.

Al menos tres días después de inyectar las células MB-49, después de anestesiar al animal, cateterizar como se acaba de demostrar y usar una jeringa de 1 mililitro con 200 a 300 microlitros de PBS estéril, lavar la orina residual de la vejiga, aspirando todo el líquido.

Inyecte 50 microgramos de proteína activadora de neutrófilos Helicobacter pylori o HPNAP, por cada 150 microlitros de PBS en la vejiga, dejando la jeringa conectada al catéter para evitar fugas. Después de una hora, retire suavemente el catéter de la uretra y coloque al ratón en una jaula debajo de una lámpara calefactora hasta que se despierte.