Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 4:42 min. • July 8th, 2025
Tome vectores retrovirales mezclados con células primarias del bazo.
Los vectores contienen ARN transgénico que codifica un receptor de antígeno quimérico o CAR, que se dirige a un antígeno específico del tumor.
La citocina interleucina-2 en el medio promueve selectivamente la proliferación de células T mientras que las otras células finalmente mueren.
Transfiera la mezcla a una microplaca recubierta con fragmentos de fibronectina recombinante.
Centrifugar para facilitar la unión de los fragmentos de fibronectina a los vectores y las células T, mediando la interacción virus-célula huésped, e incubar.
Tras la fusión de la envoltura de los vectores con la membrana celular, las enzimas virales transcriben inversamente el ARN liberado en ADN y lo incorporan al genoma del huésped.
Las células T transducidas expresan CAR unidos a la superficie, que consisten en un fragmento variable de anticuerpo extracelular dirigido al antígeno específico del tumor y a las regiones de señalización intracelular para responder al antígeno.
Vuelva a suspender las células antes de transferirlas a un tubo.
Centrifugar para descartar el sobrenadante que contiene virus no internalizados y volver a suspender l
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