Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 2:55 min. • July 8th, 2025
Comience con una suspensión de células T y trátelas con lentivirus CAR que portan un gen para el receptor de antígeno quimérico o lentivirus CAR y CRISPR.
El lentivirus CRISPR contiene genes para el ARN guía y la nucleasa Cas9, así como un gen de resistencia a los antibióticos.
Tanto los lentivirus CAR como los CRISPR interactúan con las células T y liberan su ARN.
Estos ARN se transcriben de forma inversa y se convierten en el ADN correspondiente, que se integra en el ADN de las células T.
Esto permite la síntesis de proteínas CAR, ARN guía y proteínas Cas9.
El ARN guía forma un complejo con Cas9, que reconoce y se une específicamente al gen diana en el ADN de las células T.
Mientras tanto, Cas9 escinde el ADN, creando una ruptura de doble cadena.
Esta rotura se repara mediante la unión de extremos no homólogos, un mecanismo de reparación propenso a errores, que da como resultado la modificación del gen diana.
Esto genera células T modificadas genéticamente con receptores de antígenos quiméricos.
Tratar las células con antibióticos para eliminar las células T no modificadas y aislar selectivamente las células T con CAR modificadas genéticamente.
Para interrumpir el factor estimula
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