Generación de un modelo de ratón BLT (médula ósea, hígado, timo) doblemente humanizado

Comience con un ratón anestesiado e inmunodeficiente que carece de células inmunitarias.

Trate al ratón con una dosis subletal de rayos X para eliminar las células madre existentes de la médula ósea.

Diseccionar el ratón y administrar fragmentos de hígado fetal humano y tejido del timo entre el riñón y su cápsula.

Cierre la incisión.

El hígado implantado y el tejido del timo crecen, formando organoides, que son agregados celulares que se asemejan a un órgano.

Después de la recuperación, inyecte células madre hematopoyéticas humanas o HSC en la vena de la cola.

Las HSC inyectadas migran al organoide del timo y la médula ósea, diferenciándose en varias células inmunitarias humanas.

Proporcione agua suplementada con antibióticos al ratón para matar los microbios intestinales existentes.

Usando un tubo oral, introduzca microbios fecales humanos directamente en el intestino del ratón para promover la colonización microbiana.

Esto da como resultado el desarrollo de un modelo de ratón BLT doblemente humanizado con un sistema inmunológico humano y microbios intestinales.

Para implantar los tejidos del hígado y el timo en la cápsula renal izquierda, primero, coloque al ratón en una capucha.